彗星試驗的原理是怎樣的？

　　彗星實驗也稱單細胞凝膠電泳試驗,是一種有效評估DNA損傷的方法。其原理是器官或組織經(jīng)處理（如輻射、重金屬等）后，細胞中的DNA發(fā)生單鏈或雙鏈斷裂，經(jīng)細胞及其核膜裂解后，DNA解旋，在電場作用下，DNA斷片遷移出細胞核，形成彗星狀的電泳圖譜。正常細胞的大分子DNA在電場作用下遷移距離較短，DNA仍保留在細胞核的范圍，形成圓形或輕微拖尾的圖譜。根據(jù)電泳緩沖液的pH值不同，可分為中性彗星實驗（pH=8.4）和堿性彗星實驗（pH＞13）。中性彗星實驗主要用于檢測DNA雙鏈的斷裂損傷，堿性彗星實驗具有更高的靈敏性，可用于檢測更少量的單鏈和雙鏈斷裂損傷。

 

　　需要注意的是，試驗過程中的個方面，包括樣品準備、電泳條件、視覺分析參數(shù)(如染色強度、顯微鏡光強度以及使用顯微鏡濾鏡和相機動態(tài)和環(huán)境條件(如背景照明)已經(jīng)被研究，可能影響DNA遷移。

　　每個實驗室都應證明能夠為所使用的目標組織獲得足夠質量的單細胞或細胞懸浮液，從而在彗星試驗（cometassay）中建立實驗能力。匯智泰康擁有多年毒理學服務與產(chǎn)品研發(fā)經(jīng)驗，針對不同遺傳毒性試驗開發(fā)針對試劑盒，包括彗星試驗試劑盒。首先通過%尾DNA的評價，對照處理組動物%尾DNA在低范圍內(nèi)。目前的數(shù)據(jù)表明,尾部DNA百分比(基于平均中位數(shù))在大鼠肝臟應該最好不要超過6%,這將是符合JaCVAM驗證試驗的值和其他出版和私有數(shù)據(jù)。目前還沒有足夠的數(shù)據(jù)對其他組織的最佳或可接受范圍提出建議。這并不排除合理使用其他組織。測試報告應根據(jù)已發(fā)表的文獻或專有數(shù)據(jù)，對彗星試驗在這些組織中的性能進行適當?shù)膶彶椤Ｊ紫龋趯φ战M中，需要一個較低的%尾DNA范圍，以提供足夠的動態(tài)范圍來檢測陽性的影響。其次，每個實驗室都應能夠按照不同方式，對直接誘變劑和促進劑的反應。